TRIS ကို colorimetric စစ်ဆေးမှုများတွင်အသုံးပြုနိုင်ပါသလား။ ယုံကြည်စိတ်ချရသော TRIS ပေးသွင်းသူအနေဖြင့်၊ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာဓာတုဗေဒနယ်ပယ်ရှိ သုတေသီများ၊ သိပ္ပံပညာရှင်များနှင့် ပညာရှင်များထံမှ ဤမေးခွန်းကို မကြာခဏ ကြုံဖူးပါသည်။ ဤဘလော့ဂ်ပို့စ်တွင်၊ သိပ္ပံနည်းကျအသိပညာနှင့် လက်တွေ့အတွေ့အကြုံများကို အခြေခံ၍ ရောင်စုံမက်ထရစ်စစ်ဆေးမှုများတွင် TRIS ၏ ဖြစ်နိုင်ခြေနှင့် အသုံးချမှုများကို စေ့စေ့စပ်စပ်ဖော်ပြပါမည်။
TRIS ကို နားလည်ခြင်း။
tris(hydroxymethyl)aminomethane ၏အတိုကောက်ဖြစ်သော TRIS သည် ဇီဝဓာတုနှင့် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒဓာတ်ခွဲခန်းများတွင် အသုံးများသော ကြားခံတစ်ခုဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် ရေတွင် အလွန်ပျော်ဝင်နိုင်သော အဖြူရောင်ပုံဆောင်ခဲမှုန့်ဖြစ်ပြီး ပုံမှန်အားဖြင့် 7.0 မှ 9.2 အတွင်း တည်ငြိမ်ပြီး ထိရောက်မှုရှိသော ကြားခံစနစ်ကို ပေးဆောင်သည်။ TRIS ၏ 25°C တွင် pKa သည် ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် 8.1 ဖြစ်ပြီး၊ ဇီဝဗေဒနှင့် ဓာတုဖြစ်စဉ်အမျိုးမျိုးတွင် အသုံးပြုသည့် ဖြေရှင်းချက်များ၏ pH ကို ထိန်းသိမ်းရန်အတွက် စံပြရွေးချယ်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။
TRIS ၏ ဂုဏ်သတ္တိများ ဖြစ်သည့် ၎င်း၏ အိုင်ယွန် အားနည်းသော အစွမ်းသတ္တိ နှင့် အပူချိန် ဖြစ်ပေါ်စေသော pH အပြောင်းအလဲများကို ခုခံနိုင်စွမ်း သည် ၎င်းအား အသုံးပြုမှု အများအပြားတွင် ရေပန်းစားသော ကြားခံတစ်ခု ဖြစ်လာစေသည်။ ၎င်းကို electrophoresis၊ ပရိုတင်းသန့်စင်ခြင်းနှင့် cell lysis လုပ်ထုံးလုပ်နည်းများတွင် အသုံးများသည်။ ထို့နောက်မေးခွန်းပေါ်လာသည်- ၎င်းကို colorimetric စစ်ဆေးမှုများတွင်လည်းအသုံးပြုနိုင်ပါသလား။
Colorimetric Assays- ခြုံငုံသုံးသပ်ချက်
Colorimetric assays သည် ဓာတုဗေဒတုံ့ပြန်မှုမှထုတ်လုပ်သော အရောင်၏ပြင်းထန်မှုအပေါ်အခြေခံ၍ အဖြေတစ်ခုရှိ အရာဝတ္ထုပမာဏကို တိုင်းတာသည့် ပမာဏခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအမျိုးအစားတစ်ခုဖြစ်သည်။ ဤစစ်ဆေးမှုများကို ဆေးဘက်ဆိုင်ရာရောဂါရှာဖွေခြင်း၊ ပတ်ဝန်းကျင်စောင့်ကြည့်ခြင်း၊ အစားအစာဘေးကင်းရေးစစ်ဆေးမှုနှင့် ၎င်းတို့၏ရိုးရှင်းမှု၊ တတ်နိုင်မှု၊ နှင့်အတော်လေးမြင့်မားသော အာရုံခံနိုင်စွမ်းတို့ကြောင့် ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့်အသုံးပြုပါသည်။
colorimetric assay ၏အခြေခံနိယာမသည် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု (တိုင်းတာသည့်အရာ) နှင့် ဓာတ်ပြုခြင်းကြားတွင် ဓာတုဗေဒတုံ့ပြန်မှုတစ်ခုပါဝင်ပါသည်။ ဤတုံ့ပြန်မှုသည် ရောင်စုံထုတ်ကုန်တစ်ခုကို ထုတ်ပေးပြီး တိကျသောလှိုင်းအလျားတွင် ရောင်စုံဖြေရှင်းချက်၏စုပ်ယူမှုကို spectrophotometer ဖြင့်တိုင်းတာသည်။ ထို့နောက် Beer - Lambert ဥပဒေအရ နမူနာအတွင်းရှိ စုပ်ယူမှုတန်ဖိုးသည် အချိုးကျပါသည်။
Colorimetric Assays တွင် TRIS- ဖြစ်နိုင်ခြေ
TRIS ကို colorimetric စစ်ဆေးမှုများတွင် အမှန်ပင်အသုံးပြုနိုင်ပြီး အားသာချက်များစွာကို ပေးဆောင်ပါသည်။ ပထမဦးစွာ၊ ၎င်း၏ buffering စွမ်းရည်သည် အရောင်ဖွဲ့စည်းမှုတုံ့ပြန်မှုအတွက် အကောင်းဆုံး pH ကို ထိန်းသိမ်းရန် ကူညီပေးသည်။ ရောင်စုံမက်ထရစ်တုံ့ပြန်မှုအများအပြားသည် pH အလွန်မြင့်မားသည် - နှင့် pH ၏သေးငယ်သောပြောင်းလဲမှုများသည်ထုတ်လုပ်သောအရောင်၏ပြင်းထန်မှုနှင့်တိကျမှုကိုသိသိသာသာထိခိုက်စေနိုင်သည်။ TRIS ကို ကြားခံအဖြစ်အသုံးပြုခြင်းဖြင့်၊ တုံ့ပြန်မှုအရောအနှော၏ pH သည် စစ်ဆေးမှုတစ်လျှောက်လုံး တည်ငြိမ်စေပြီး တစ်သမတ်တည်းနှင့် ယုံကြည်စိတ်ချရသောရလဒ်များကို သေချာစေနိုင်သည်။
ဒုတိယအနေဖြင့်၊ TRIS သည် ရောင်စုံမက်ထရစ်စစ်ဆေးမှုများတွင်အသုံးပြုသည့် ကျယ်ပြန့်သောဓာတ်ပစ္စည်းများနှင့် ယေဘုယျအားဖြင့် သဟဇာတဖြစ်သည်။ ရောင်စုံထုတ်ကုန်များထုတ်လုပ်သည့် ဓာတုတုံ့ပြန်မှုအများစုကို အနှောင့်အယှက်မဖြစ်စေပါ။ ဥပမာအားဖြင့်၊ ရောင်စုံဒြပ်ပေါင်းကိုဖွဲ့စည်းရန်အလွှာတစ်ခု၏ဓာတ်တိုးခြင်းပါ၀င်သောစစ်ဆေးမှုများတွင် TRIS သည် ဓာတ်တိုးအေးဂျင့်များ သို့မဟုတ် အလွှာကိုယ်နှိုက်က ဓာတ်ပြုခြင်းမရှိသောကြောင့် အရောင်ဖွဲ့စည်းမှုတုံ့ပြန်မှုကိုချောမွေ့စွာလုပ်ဆောင်နိုင်စေပါသည်။
သို့သော်၊ colorimetric assays တွင် TRIS ကိုအသုံးပြုသောအခါထည့်သွင်းစဉ်းစားမှုအချို့ရှိသည်။ ဖြစ်နိုင်ချေရှိသော ပြဿနာတစ်ခုမှာ TRIS သည် အချို့သောသတ္တုအိုင်းယွန်းများဖြင့် ရှုပ်ထွေးမှုများကို ဖန်တီးနိုင်ခြင်းကြောင့်ဖြစ်သည်။ အကယ်၍ colorimetric assay တွင် metal - ion - catalyzed reactions သို့မဟုတ် metal - reagents များပါ၀င်ပါက၊ အဆိုပါ complexes များသည် တုံ့ပြန်မှုနှုန်း သို့မဟုတ် နောက်ဆုံးထုတ်ကုန်၏ အရောင်ကို ထိခိုက်စေနိုင်ပါသည်။ ထိုသို့သောအခြေအနေများတွင်၊ TRIS ၏အာရုံစူးစိုက်မှုကို ဂရုတစိုက်ရွေးချယ်ရန်နှင့် သတ္တု-မှီခိုမှုလုပ်ငန်းစဉ်များကို အနှောင့်အယှက်မဖြစ်စေကြောင်း သေချာစေရန် လိုအပ်ပါသည်။
Specific Colorimetric Assays တွင် TRIS ၏အသုံးချမှုများ
ပရိုတင်းစစ်ဆေးမှုများ
ပရိုတင်းစစ်ဆေးမှုများသည် colorimetric နည်းလမ်းများ၏အသုံးအများဆုံးအသုံးပြုမှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ ဥပမာ Bradford assay သည် ပရိုတိန်း၏အာရုံစူးစိုက်မှုကို ဆုံးဖြတ်ရန်အတွက် တွင်ကျယ်စွာအသုံးပြုသော colorimetric နည်းလမ်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ ဤစစ်ဆေးမှုတွင်၊ Coomassie Brilliant Blue G - 250 သည် ပရိုတင်းများနှင့် ပေါင်းစပ်ကာ ဆိုးဆေး၏ စုပ်ယူမှုအပိုင်းတွင် အနီရောင်မှ အပြာသို့ ပြောင်းလဲသွားပါသည်။ ချည်နှောင်တုံ့ပြန်မှုအတွက် သင့်လျော်သော pH ကို ထိန်းသိမ်းရန် နမူနာပြင်ဆင်မှုနှင့် တုံ့ပြန်မှုအဆင့်များတွင် TRIS ကို ကြားခံအဖြစ်အသုံးပြုနိုင်သည်။ TRIS - buffered solutions ကိုအသုံးပြုခြင်းဖြင့် Bradford assay ၏ တိကျမှုနှင့် ပြန်လည်ထုတ်လုပ်နိုင်မှုကို မြှင့်တင်နိုင်ပါသည်။
အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက် စစ်ဆေးမှု
ရောင်စုံမက်ထရစ်စစ်ဆေးမှုများကို အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်ကို တိုင်းတာရန်အတွက်လည်း မကြာခဏအသုံးပြုပါသည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊ peroxidase အင်ဇိုင်းစမ်းသပ်မှုတွင်၊ ဟိုက်ဒရိုဂျင်ပါအောက်ဆိုဒ်ကို အလွှာတစ်ခုအနေဖြင့် အသုံးပြုသည်၊ နှင့် chromogenic substrate ဖြစ်သည့်O - Phenylene Diamine (OPDA)သို့မဟုတ်M - Phenylene Diamine (MPD)peroxidase ၏ရှေ့မှောက်တွင်အရောင်အသွေးထုတ်ကုန်တစ်ခုဖွဲ့စည်းရန် oxidized ။ TRIS ကို တုံ့ပြန်မှုအရောအနှောကို ကြားခံရန် အသုံးပြုနိုင်ပြီး အင်ဇိုင်းတုံ့ပြန်မှုဖြစ်ပေါ်ရန်အတွက် တည်ငြိမ်သောပတ်ဝန်းကျင်ကို ပေးဆောင်နိုင်သည်။ peroxidase - ဓာတ်ပြုတုံ့ပြန်မှုများစွာအတွက် အကောင်းဆုံး pH သည် 7.0 မှ 8.0 ဝန်းကျင်ဖြစ်ပြီး TRIS ကြားခံများကို အသုံးပြု၍ အလွယ်တကူ ထိန်းသိမ်းနိုင်သည်။
ပတ်ဝန်းကျင် စောင့်ကြည့်လေ့လာရေး
ပတ်ဝန်းကျင်စောင့်ကြည့်မှုတွင်၊ ရေနှင့်လေနမူနာများတွင် ညစ်ညမ်းမှုအမျိုးမျိုး၏ပါဝင်မှုနှင့် အာရုံစူးစိုက်မှုကို သိရှိရန် ရောင်စုံမက်ထရစ်စစ်ဆေးမှုများကို အသုံးပြုသည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊ ရေထဲတွင် လေးလံသောသတ္တုများကို ရှာဖွေတွေ့ရှိခြင်းသည် သတ္တုအိုင်းယွန်းများဖြင့် ရောင်စုံရှုပ်ထွေးမှုများဖြစ်စေသော ရောင်စုံဓာတ်ပစ္စည်းများကို အသုံးပြု၍ လုပ်ဆောင်နိုင်သည်။ထရစ်pH ကိုထိန်းချုပ်ရန်နှင့် အရောင်ဖွဲ့စည်းခြင်းတုံ့ပြန်မှု၏ sensitivity ကိုတိုးမြှင့်ရန် ဤစစ်ဆေးမှုများတွင် ကြားခံအဖြစ်အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။ ထို့အပြင်၊ အော်ဂဲနစ်ညစ်ညမ်းမှုကို ထောက်လှမ်းရာတွင်၊ အချို့သော စစ်ဆေးမှုများတွင် ရောင်စုံထုတ်ကုန်များဖြစ်လာစေရန် ညစ်ညမ်းသောဓာတ်တိုးခြင်းပါဝင်ပြီး TRIS သည် တုံ့ပြန်မှုအခြေအနေများကို အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် ကူညီပေးနိုင်သည်။
အခြား Buffers များနှင့် နှိုင်းယှဉ်ခြင်း။
colorimetric assays တွင် TRIS ကိုအသုံးပြုရန်စဉ်းစားသောအခါ၊ ၎င်းကိုအခြားအသုံးများသောကြားခံများနှင့်နှိုင်းယှဉ်ရန်အရေးကြီးသည်။ ဖော့စဖိတ်ကြားခံများသည် ဇီဝဓာတုနှင့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုဆိုင်ရာအသုံးချမှုများတွင် ရေပန်းစားသောရွေးချယ်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ သို့သော်၊ ဖော့စဖိတ်ကြားခံများသည် ရောင်စုံမက်ထရစ်တုံ့ပြန်မှုများစွာဖြစ်ပေါ်သည့် pH အပိုင်းတွင် အရှိန်လျော့သွားကာ ၎င်းတို့သည် စစ်ဆေးမှုတွင် အနှောင့်အယှက်ဖြစ်စေနိုင်သည့် သတ္တုအိုင်းယွန်းအချို့နှင့် မိုးရေစက်များအဖြစ် ဖွဲ့စည်းနိုင်သည်။
အခြားတစ်ဖက်တွင်၊ TRIS သည် ၎င်း၏ pKa တန်ဖိုးဝန်းကျင်တွင် buffering စွမ်းရည်ပိုမိုမြင့်မားပြီး precipitates များဖြစ်ပေါ်လာနိုင်ချေနည်းပါးသောကြောင့် ၎င်းသည် colorimetric assay အများအပြားတွင် ပိုမိုသင့်လျော်သောရွေးချယ်မှုတစ်ခုဖြစ်စေသည်။ မည်သို့ပင်ဆိုစေကာမူ၊ နောက်ဆုံးတွင် ကြားခံရွေးချယ်မှုသည် pH အကွာအဝေး၊ ဓာတ်ပစ္စည်းများ၏သဘောသဘာဝနှင့် စွက်ဖက်သည့်အရာများပါဝင်မှုကဲ့သို့သော စစ်ဆေးမှု၏ သီးခြားလိုအပ်ချက်များအပေါ် မူတည်ပါသည်။
Colorimetric Assays အတွက် TRIS ၏ အရည်အသွေး
TRIS ပေးသွင်းသူတစ်ဦးအနေဖြင့်၊ ရောင်စုံမက်ထရစ်စစ်ဆေးမှုများအတွက် အရည်အသွေးမြင့် TRIS ပေးအပ်ခြင်း၏ အရေးပါမှုကို ကျွန်ုပ်တို့ နားလည်ပါသည်။ TRIS ရှိ အညစ်အကြေးများသည် အရောင်ကို အနှောင့်အယှက်ဖြစ်စေနိုင်သည် - တုံ့ပြန်မှုများဖွဲ့စည်းကာ စစ်ဆေးမှုရလဒ်များ၏ တိကျမှုကို ထိခိုက်စေနိုင်သည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ TRIS ထုတ်ကုန်များသည် အပြင်းထန်ဆုံးအရည်အသွေးစံနှုန်းများနှင့်ကိုက်ညီစေရန် ဂရုတစိုက်ထုတ်လုပ်ထားပြီး သန့်စင်ပါသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ TRIS သည် colorimetric စစ်ဆေးမှုများ၏ စွမ်းဆောင်ရည်ကို ထိခိုက်စေနိုင်သော ညစ်ညမ်းမှုများမှကင်းစင်ကြောင်း သေချာစေရန်အတွက် အဆင့်မြင့်ထုတ်လုပ်မှုနည်းပညာများနှင့် အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှုအစီအမံများကို အသုံးပြုပါသည်။
နိဂုံး
နိဂုံးချုပ်အားဖြင့်၊ TRIS ကို colorimetric စစ်ဆေးမှုများတွင် ထိရောက်စွာအသုံးပြုနိုင်ပါသည်။ ၎င်း၏ buffering ဂုဏ်သတ္တိများ၊ ဓာတ်ပစ္စည်းများများစွာနှင့် လိုက်ဖက်ညီမှု နှင့် ကျယ်ပြန့်စွာရရှိနိုင်မှုတို့က ၎င်းအား ဤခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုနည်းလမ်းများတွင် တန်ဖိုးရှိသော အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်စေသည်။ သင်သည် ပရိုတင်းဓာတ်စစ်ဆေးမှု၊ အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုတိုင်းတာခြင်း သို့မဟုတ် ပတ်ဝန်းကျင်စောင့်ကြည့်ခြင်းများကို လုပ်ဆောင်နေသည်ဖြစ်စေ TRIS သည် အရောင်တုံ့ပြန်မှုပုံစံအတွက် အကောင်းဆုံးအခြေအနေများကို ထိန်းသိမ်းရန်နှင့် သင့်ရလဒ်များ၏ ယုံကြည်စိတ်ချရမှုကို မြှင့်တင်ပေးနိုင်သည်။
မင်းရဲ့ colorimetric assays အတွက် TRIS ကို အသုံးပြုဖို့ စိတ်ဝင်စားတယ် ဒါမှမဟုတ် ငါတို့ရဲ့ TRIS ထုတ်ကုန်တွေအကြောင်း မေးစရာတွေရှိတယ်ဆိုရင် နောက်ထပ်အချက်အလက်တွေအတွက် ကျေးဇူးပြုပြီး မင်းရဲ့ဝယ်ယူမှုလိုအပ်ချက်တွေကို ဆွေးနွေးဖို့ ကျွန်တော်တို့ကို ဆက်သွယ်လိုက်ပါ။ သင်၏ သီးခြားလိုအပ်ချက်များနှင့် ကိုက်ညီသော အရည်အသွေးမြင့် TRIS ကို ပေးဆောင်ရန် ကျွန်ုပ်တို့ မျှော်လင့်ပါသည်။
ကိုးကား
- ကောင်းပြီ၊ NE၊ et al။ ဇီဝဗေဒသုတေသနအတွက် ဟိုက်ဒရိုဂျင်အိုင်းယွန်းကြားခံများ။ ဇီဝဓာတုဗေဒ၊ ၅(၂)၊ ၄၆၇ - ၄၇၇ (၁၉၆၆)။
- Bradford၊ MM ပရိုတင်း - ဆိုးဆေး ပေါင်းစပ်ခြင်းနိယာမကို အသုံးပြု၍ ပရိုတင်း၏ မိုက်ခရိုဂရမ် ပမာဏအတွက် လျင်မြန်ပြီး အကဲဆတ်သော နည်းလမ်း။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာ ဇီဝဓာတုဗေဒ၊ 72(1 - 2)၊ 248 - 254 (1976)။
- Bergmeyer၊ HU ၏ Enzymatic ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုနည်းလမ်းများ။ Verlag Chemie၊ Weinheim (1974)။
